Skalierbare, musterbare Nano-Punkt-Arrays auf ITO via Elektrolyse für High-Performance SERS
Zusammenfassung
Die Fertigung von Großflächen-Geräten mit musterbaren Nanostrukturen ist wichtig für praktische Anwendungen in optischen oder elektrischen Geräten. Diese Arbeit beschreibt eine einfache und umweltfreundliche Methode zur Herstellung von Großflächen-Nano-Punkt-Arrays (ND-Arrays) via elektrolytischer Reaktion eines Metalloxidfilms. NDs mit variabler Größe und Morphologie lassen sich durch Anpassung der angewendeten Spannung, Elektrolysezeit und ITO-Schichtdicke erhalten. Hochdichte NDs von 50–60 nm Größe werden durch Elektrolyse einer 25-nm-dicken ITO-Schicht bei 150 V für 1,5 min unter Wassertropfenmedium erzielt, welche nach Aufdampfen einer dünnen Silberschicht für Surface-Enhanced Raman Spectroscopy (SERS) angewendet werden. Der optimierte ND-Struktur-SERS-Substrat zeigt sensitive Detektion von Rhodamin 6G (R6G) mit Nachweisgrenze bis 5 × 10-12 M. Verstärkungsfaktoren (EFs) von 1,12 × 106 und 6,79 × 105 wurden für 4-Methylbenzenthio (4-MBT) und R6G erreicht. Mit zusätzlichem Photolithografie-Schritt können mehrere ND-Array-Bereiche auf einem Substrat erzeugt werden, was simultane Detektion verschiedener Proben mit unterschiedlichen Molekülen in einem Experiment ermöglicht. Solche Methode ist schnell, einfach, musterbar und umweltfreundlich – geeignet für vor-Ort schnelle und synchrone Bestimmung verschiedener Moleküle für POCT, Umweltüberwachung, Flughafensicherheit.
Einleitung
Surface-Enhanced Raman Scattering (SERS) wurde vor Jahrzehnten an rauer Silber-Elektrodenoberfläche beobachtet [1]. Breit untersucht nicht nur zum Verständnis des SERS-Mechanismus, sondern auch für praktische Anwendungen. Zwei klassische SERS-Substrat-Serien: selbstassemblierte kolloidale Materialien und nanofabrizierte Strukturen [2]. Nanopartikel von Münzmetallen (Ag, Au, Cu) für SERS synthetisiert [3, 4]. Nanopartikelsysteme einfach anzuwenden, aber mangelnde Reproduzierbarkeit, relativ niedrige Sensitivität [5, 6]. Nanostrukturen via E-Beam-Lithografie [7, 8], Laser-Interferenz-Lithografie [9, 10], Fokussierter-Ionenstrahl-Lithografie [11], Nanosphären-Lithografie [12], Nanoimprint-Lithografie [13] zeigen hohe Signalverstärkung mit exzellenter Reproduzierbarkeit. Allerdings: teure Ausrüster, Reinraum-Umgebung, langsamer Fertigungsprozess.
Da SERS direkt für molekulares Sensing und Identifikation in wässrigem Medium ohne Wasserstörung nutzbar ist, breit angewendet für kleine und Biomolekül-Sensing [14,15,16]. Für breitere Anwendungen: einfache, schnelle Fertigung von SERS-Mikroarray-Substraten hoch gefragt für simultane Detektion verschiedener Moleküle, besonders POCT und Sicherheitsmonitoring. Beide kolloidale Partikelassembly und Nanofabrikation involvieren diverse Chemikalien oder hohen Energieverbrauch: spezielle Chemikalien/Gase für Partikelsynthese, Trockenätzprozesse, hoher Energieverbrauch für Schicht-für-Schicht-Design und Deposition. Verschiedene umweltunfreundliche Verschmutzungen: organisch, Säure, Base, Schwermetallionen, toxische Ätzgase.
ITO-Filme via Standard-Metallabscheidung herstellbar, weit verbreitet als leitende Substrate (Transparenz, niedrige Kosten). Gao et al. berichteten: ITO-Film transformierbar zu Indium (In)-Punkten unter kathodischer Polarisation in NaOH-Lösung [17].
Hier schlagen wir einfachere, schnellere, grünere Technologie vor: NDs auf Glasoberfläche via direkter Elektrolyse von ITO-Film in Wasser in einem Schritt. Mit zusätzlichem Photolithografie-Prozess können ND-Arrays mit gemusterten, multiplen separierten Bereichen auf einem Substrat erstellt werden – simultane Bestimmung multipler Proben mit verschiedenen Molekültypen. Elektrolyse unter milden Bedingungen bei niedriger Spannung in Wasserumgebung/Medium.
Materialien und Methoden
Materialien und Reagenzien
ITO-Glas (1,1 mm) von Luoyang Longqian Glass Co. (Henan, China), ITO-Dicken 25, 50, 100, 200 nm → Quadratwiderstand 93,52, 31,05, 15,86, 6,97 Ω/sq. FTO-Glas (2,2 mm) von Yaoke Photoelectric Co. (Jiangsu, China), FTO-Dicke 400 nm, Quadratwiderstand 10,85 Ω/sq. Deionisiertes (DI) Wasser (18,25 MΩ·cm, 25 °C) via Milli-Q Plus (Sichuan Wortel). Ethanol (Damao, Tianjin), Aceton (Zhiyuan, Tianjin) zur ITO-Reinigung. Photoresist SUN-120P (Suntific, Shandong) für ITO-Patterning. 4-MBT (98%), MESNa (≥98%), Dopaminhydrochlorid (Sigma-Aldrich, St. Louis). R6G (98,5%) (J&K Scientific, Beijing). KOH (GR 95%), Melamin (99%) (Aladdin, Shanghai). D-(+)-Glucose (99%) (Alfa Aesar, Shanghai). Methylenblau (AR), Harnstoff (AR ≥99%), Phosphorsäure (AR 85%) (Damao, Tianjin). Formaldehydlösung (AR 37–40%), Natriumdihydrogenphosphatdihydrat (AR ≥99%), Dinatriumhydrogenphosphatdodecahydrat (AR ≥99%) (Guangzhou Chemical Reagent Factory). Alle Chemikalien as received.
Elektrolyse von ITO-Film in Wasser
ITO-Glassubstrat zugeschnitten, sequentiell in Aceton, Ethanol, DI-Wasser gereinigt (je 15 min), gründlich DI-Wasser gespült, N2-getrocknet. Abb. 1 zeigt Fertigungsprozess-Schema. DI-Wassertropfen auf ITO-Oberfläche als Elektrolyse-Medium. Wolfram (W)-Draht in Tropfen, an Pluspol; ITO-Film an Minuspol Netzteil (PSW800-1.44, GWINSTEK, Taiwan), wie Abb. 1a. Spannung angelegt → ITO elektrolytisch zu In-NDs im Wasserbereich (Abb. 1b).
Zudem: ITO-Film leicht in Mikrometer- bis Zentimeterbereich musterbar. ITO-Film auch zu Array mit verschiedenen isolierten Bereichen (NDs) musterbar → multiple funktionale Bereiche auf einem Substrat. Wichtig für High-Throughput/Multi-Detektionsgeräte. Zur Erstellung gemusterter ND-Arrays: 3,5 × 3,5 cm2 ITO-Glasoberfläche via Photolithografie in separate Quadrate strukturiert. Anschließend: grid-gemustertes ITO-Substrat und flaches ITO-Substrat Face-to-Face gebondet → In-Parallele-Gerät, versiegelt mit 200-μm-Presskleberahmen, DI-Wasser befüllt. Flaches und gemustertes ITO an Plus- bzw. Minuspol Netzteil. Methode hoch geeignet für Großflächen- und gemusterte ND-Arrays.
SERS-Messungen
Durch Variation angewendeter Spannung, Elektrolysezeit, ITO-Schichtdicke: ND-Größe und Dichte variierbar. Gebildete NDs typischerweise Zehner bis Hunderter Nanometer, eng angeordnet → Nanogaps. SERS-Substrat durch Aufdampfen dünner Ag-Schicht (PD400, Wuhan PDVACUUM).
Sensitivitätscharakterisierung: Raman-Spektren via Renishaw inVia Raman Mikroskop (Renishaw 42 K846, Renishaw Co., UK). SERS-Substrat 1 h in Analytlösung, 1 min entsprechendes Lösungsmittel gespült, N2-getrocknet. Getrocknetes Substrat auf Raman-Mikroskop-Bühne. 532 nm Laser, ~0,14 mW, ×50 Objektiv (NA=0,5, Leica). Laser-Spot-Durchmesser 1,30 μm. Elastisch gestreute Laseranregung via Edge-Filter entfernt. Je Raman-Spektrum 10 s Akkumulation.
Vielseitigkeit/Schnelldetektion: 9 Sondenmoleküle (4-MBT, R6G, Dopaminhydrochlorid, Harnstoff, Formaldehyd, Methylenblau, MESNa, D-(+)-Glucose, Melamin) zur Charakterisierung vorbereitetem SERS-Substrat für simultane Bestimmung multipler Moleküle. 4-MBT, Methylenblau in Ethanol. MESNa in DI-Wasser pH 2,7 (Phosphatpuffer). D-(+)-Glucose in Phosphatpuffer pH 7,5. Rest in DI-Wasser gelöst. Je Messung: 3,0 μL Tropfen auf Substrat, sofort Raman-Spektrum. Analytkonzentrationen: 10-4 M (4-MBT Ethanol), 5×10-11 M (R6G wässrig), 10-3 M (Dopamin), 0,5 M (Harnstoff), 10-3 M (Formaldehyd), 10-5 M (Methylenblau Ethanol), 10-2 M (MESNa), 1 M (Glucose), 10-2 M (Melamin). Alle Messungen sofort via Raman-Instrument (Finder Insight, Zolix, Beijing) mit 532 nm, 2,5 mW. 10-μm Laserstrahl, ×50 Objektiv (NA=0,55). Je Spektrum 0,3 s, 10× Akkumulation.
Weitere Charakterisierungen
Morphologien via FE-SEM (ZEISS-Ultra 55, Carl Zeiss, Deutschland) 5 kV. TEM (JEM-2100HR, JEOL, Japan). Nanodots abgekratzt, DI-Wasser dispersiert. Chemische Zusammensetzung via EDS (FE-SEM) und XRD (X'Pert PRO, PANalytical, Niederlande) Cu Kα, 0,04°/s, 2θ 20–65°. Absorptionsspektrum 440–650 nm via Spektrometer (USB 2000+, Ocean Optics, USA).
Ergebnisse und Diskussion
Nanodot-Bildung durch Elektrolyse von ITO-Film in Wassermedium
ITO-Filme als transparente leitende Substrate breit in Optoelektronik: LED [18], Displays [19], Solarzellen [20]. Allgemein: ITO-Korrosion schädlich für Elektronik. Hier: ITO-Korrosion durch Elektrolyse genutzt für eng gepackte NDs → SERS-Anwendung. Schema Elektrolyse-induzierte ND-Bildung Abb. 1a, b. ITO-Oberfläche vor Elektrolyse flach/transparent (Abb. 1c). ITO: In2O3 und SnO2 in variablen Anteilen. EDS (Zusatzdatei 1: Abb. S1) charakterisiert Zusammensetzung. Nach Elektrolyse: ITO-Oberfläche transluzent, gelb nach Trocknung. SEM: eng gepackte NDs auf Glas (Abb. 1d). XRD (Abb. 1e): drei neue Peaks nach Elektrolyse → (101), (002), (110) Kristallebenen von In-Element. ITO-Peaks niedriger. TEM (Abb. 1f): gebildete NDs = In-Material.
ITO-Film: Metalloxid mit kristallinen/amorphen Morphologien, typisch nanoskaliger Oberflächenrauheit [21]. Berichtet: ITO korrodierbar durch NaOH zu In-Nanopartikeln [17]. Spannung an ITO-Film → Elektronentransfer Kathode/Anode. Elektrochemische Reaktionen Kathode/Anode: Kathode: In2O3 + 3H2O + 6e− → 2In + 6OH− (1); Anode: 4OH− → O2 + 2H2O + 4e− (2). ND-Bildungsprozess Abb. 2. Anfangs: homogene Elektrolyse über ITO-Oberfläche. ITO-Film nicht perfekt homogen (Dickenvariation normaler Fertigung, besonders amorphe ITO [22]). Zeitentwicklung: dünnerer Bereich schneller verbraucht (höheres E-Feld, geringere Dicke) → Defekte. Nach Sättigungskonzentration in Wasser: reduzierte In-Atome akkumulieren zu NDs auf Oberfläche. Während Elektrolyse: offensichtliche Transparenz-/Farbänderung. Interfacialspannung bei Dewetting-Prozess → große Menge NDs auf Oberfläche. Methode ohne spezifische Behandlung/Chemikalien, in Wassermedium mit angelegter Spannung → umweltfreundliche Technologie.
Elektrolyse-Parameter: Reaktionszeit, angewendete Spannung, ITO-Schichtdicke
ND-Größe/Dichte abhängig von ITO-Dicke und Reaktionskinetik [23]. Effektive Faktoren: Reaktionszeit, Spannung, ITO-Dicke untersucht zur ND-Bildungsprozess-Optimierung für SERS-Substrat mit hoher Sensitivität. Abb. 3a: SEM-Bilder NDs auf Glas (25 nm ITO) bei 150 V, verschiedene Reaktionszeiten. Offensichtlicher sequentieller Bildungsprozess: kontinuierlicher ITO-Film (Abb. 1c) → kleine NDs im Film eingebettet → raue NDs → glatte NDs → stehende, getrennte NDs (Abb. 3a links nach rechts). Gradueller Morphologie-/Größenwandel durch Elektrolyse und diffusionskontrollierte ND-Bildung.
Initial: ITO-Film reagiert an Oberfläche. Dünnere Bereiche: höheres E-Feld → höhere initiale Reaktionsgeschwindigkeit → Defekte an Dünnstellen → In-Atome akkumulieren zu NDs. Stadium: kleine NDs noch in Defektbereichen, von ITO-Film umgeben. Zeitverlauf: meiste ITO reduziert → In-NDs auf Oberfläche. 0,5 min: große Menge NDs, im ITO-Film eingebettet. 1,5 min: ND-Größe/Dichte erhöht, Lücke zwischen NDs verringert. 3,0 und 5,0 min: NDs größer, runder, Lücke erhöht. Elektrische Messungen: ND-Bereiche nicht leitend → isolierte NDs ohne kontinuierliche Verbindung. Abb. 3a: bei 1,5 min relativ uniforme ND-Größe, eng angeordnet. Kleinere Lücke → stärkere EM-Verstärkung. 1,5 min für SERS-Samples gewählt.
Anschließend: Effekt angewendeter Spannung auf ND-Größe/Dichte. 25 nm ITO-Glas, Elektrolyse 1,5 min, verschiedene Spannungen. Abb. 3b: ND-Dichte steigt mit Spannung. Niedrige Spannung (50, 100 V): geringe ND-Menge, niedrige Dichte, offensichtlich getrennt. 150, 200 V: mehr NDs, eng angeordnet. Uniforme Größe, hohe Dichte essenziell für reproduzierbare Raman-Spektren mit hoher Sensitivität. Optimale Spannung für SERS-Substrat: 150 V.
Abb. 3c: SEM NDs aus 25, 50, 100, 200 nm ITO-Filmen, Elektrolyse 150 V, 1,5 min. 25 nm ITO: höhere Dichte, uniformere NDs vs. dickere Filme. Bericht: Oberflächenrauheit/Widerstand leitender Substrate beeinflussen Kristallinität [22]. Rauheit steigt mit Dicke. Uniformere NDs von dünnerem ITO → flachere Oberfläche, weniger Defekte. Dünnster ITO → geringste Rauheit → uniformste NDs. Andererseits: ITO-Widerstand beeinflusst initiale In-ND-Bildung. Quadratwiderstände: 93,52, 31,05, 15,86, 6,97 Ω/sq (25, 50, 100, 200 nm). Gleiche Spannung → niedrigerer Strom dünnem Film → langsame, milde Reaktion → konsistent mit Ergebnis: uniformere, höherdichte NDs aus dünneren ITO-Filmen. Experimentelle Parameter für SERS: ITO 25 nm, 150 V, 1,5 min. Auch FTO-Film elektrolytisch getestet (Zusatzdatei 1: Abb. S2): Mikro-/Nanopartikel nach Elektrolyse → Elektrolyse auch für andere Metalloxidfilme bei verschiedenen Bedingungen möglich, Potenzial für andere Anwendungen.
SERS-Charakterisierung
SERS-Effekt evaluiert: 4-MBT als Sondenmolekül (kleine, gut charakterisierte Peaks, großer Raman-Querschnitt [24]). Dünne Ag-Schicht auf optimiertem Substrat (hochdichte NDs). SEM (Zusatzdatei 1: Abb. S3a–c): Ag-bedeckte NDs bei 30, 77, 160 nm Ag-Dicke. Variierende Ag-Dicke → Lücken zwischen NDs verringert. Höchste mittlere Raman-Intensität bei 77 nm Ag (Zusatzdatei 1: Abb. S3d).
Abb. 4a, b: Detaillierte SERS-Charakterisierung Substrat mit In-NDs (optimierte Bedingungen) + 77 nm Ag. Referenz: 77 nm Ag direkt auf ITO (25 nm) Glas. Raman-Signal signifikant verstärkt auf ND-SERS-Substrat vs. Referenz. Zwei Hauptpeaks 4-MBT bei 1079 und 1594 cm-1 klar auf ND-SERS-Substrat. 1079 cm-1: Phenyl-Ring-Atmung, C–H in-plane bending, C–S stretching. 1594 cm-1: Phenyl-Stretching (8a Schwingungsmode) [25].
Homogenität Großfläche: 10 Messungen auf gleichem Substrat, zufälliges Bewegen auf Raman-Bühne. Abb. 4b: gemessene Spektren → relativ konsistente Signalintensitäten für 4-MBT-Peaks. Relative Standardabweichung (RSD) Raman-Intensität 1594 cm-1 ≈ 4,1 % → hohe Signalreproduzierbarkeit SERS-Substrat via vorgeschlagenem Prozess.
R6G für Zuverlässigkeit/Sensitivität: Abb. 4c – Raman-Spektren as-prepared ND-SERS-Substrat vs. Referenz-Ag-Film. Charakteristische R6G-Peaks: 614, 771, 1187, 1362, 1507, 1571, 1648 cm-1. 614, 771, 1187 cm-1: C–C–C Ring in-plane bending, C–H out-of-plane bending, C–O–C stretching. 1362, 1507, 1571, 1648 cm-1: aromatische C–C Stretching [26].
Abb. 4d: Raman-Spektren as-prepared ND-SERS-Substrat, R6G wässrig 5×10-12 bis 5×10-7 M. Raman-Intensitäten fallen offensichtlich mit Konzentration. Charakteristische Peaks noch klar identifizierbar bei 5×10-12 M → hohe Sensitivität fabrizierten ND-SERS-Substrats. Quantifizierung SERS-Effekt: Enhancement Factor (EF) berechnet. Raman-Spektren reiner 4-MBT/R6G-Pulver (Zusatzdatei 1: Abb. S4), EF-Berechnung Details (Zusatzdatei 1: Abb. S5) in Supplement. EFs: 4-MBT 1,12×106 (1079 cm-1), R6G 6,79×105 (1648 cm-1). Moleküle mit kleinerem Raman-Querschnitt (MESNa [27]) auch gemessen (Zusatzdatei 1: Abb. S6) → zuverlässiger SERS-Effekt.
SERS-Verstärkung: elektromagnetisch (EM) und chemisch (CM) [28]. Zusatzdatei 1: Abb. S7 – Absorptionsspektrum ND-Substrat + 77 nm Ag. Referenz: 77 nm Ag auf blankem ITO (25 nm). ND-Substrat: optimierte Parameter (25 nm ITO, 150 V, 1,5 min). SPR-Peak ND-SERS-Substrat ~453 nm (Zusatzdatei 1: Abb. S7), nahe Anregungswellenlänge 532 nm → EM-Verstärkung dominiert via „Hotspots“ aus Inter-Gaps zwischen NDs. FDTD-Simulation für E-Feld in Inter-Gaps (Zusatzdatei 1: Abb. S8). Maximaler Faktor 3,0 → Feldverstärkung |E|2 103 → EF 106, gute Übereinstimmung Experiment (1,12×106 4-MBT, 6,79×105 R6G).
Halbleitermaterialien (In2O3, SnO2, TiO2) verstärken SERS via Ladungstransfer Molekül-Material (z. B. R6G Übergangsmetalloxide, 4-MBA/4-NBT & SnO2) – CM-bezogen [28, 30,31,32,33]. ITO = In2O3 + SnO2. Nach ITO-Elektrolyse in Wasser: In-NDs via elektrochemische Reduktion; ITO-Peaks noch offensichtlich (Abb. 1e). CM-Beitrag In2O3/SnO2-zu-Molekül-Ladungstransfer untersucht: Raman 10-4 M 4-MBT, 5×10-7 M R6G auf ITO-Glas, ND-Substrat nach Elektrolyse, ITO+77 nm Ag, ND-Substrat+77 nm Ag (Zusatzdatei 1: Abb. S9). ND-Substrat: optimierte Parameter. Charakteristische Peaks 4-MBT/R6G auf ITO, ND-Substrat, ITO+Ag schwer unterscheidbar; aber offensichtlich auf ND-Substrat+Ag. CM-Verstärkung In2O3/SnO2-zu-Molekül vernachlässigbar vs. EM. Hochverstärkter SERS-Effekt hauptsächlich EM-Verstärkung zwischen Inter-Gaps In-NDs.
Gemusterte ND-Arrays für simultane SERS-Charakterisierung verschiedener Proben auf einem Substrat
Methode erstellt NDs einfach/schnell via Elektrolyse auf nanoskaligem ITO-Film. Zudem: ITO-Film teilschützend/segmentierend musterbar → Arrays auf einem Substrat (Schema Abb. 5a). Drei 3,5×3,5 cm2 Substrate gemustert zu 1×1, 3×3, 5×5 SERS-Bereichen (Abb. 5b). ITO-Fläche für Elektrolyse vergrößert vs. Tropfenelektrolyse → Gesamtladung steigt → Strom steigt, Widerstand sinkt. Netzteil Stromlimit 1,512 A → max. Ausgangsspannung ~75 V für In-NDs in gemusterten In-Parallele-Zellen. Elektrolysezeit untersucht (Zusatzdatei 1: Abb. S10). Höchste Dichte/Uniformität ND-Arrays bei 5,0 min. Optimierte Parameter: ITO 25 nm, 75 V, 5,0 min für Großflächen-SERS-Substrat mit gemusterten ND-Arrays. 50×50 μm2 Quadrate, Gap ~5,0 μm (Zusatzdatei 1: Abb. S11).
3×3-Substrat (optimierte Bedingungen) als SERS-Substrat für Multi-Sample-Detektion. Abb. 6a: 9 Einzeltropfen (3,0 μL) 9 verschiedene Analytlösungen auf 9 gemusterte Bereiche. 9 Analyten: 4-MBT [25], R6G [26], Dopaminhydrochlorid [34], Harnstoff [35], Formaldehyd [36], Methylenblau [37], MESNa [38,39], D-(+)-Glucose [40], Melamin [41] → Samples 1–9. Abb. 6b: alle 9 Moleküle zeigen offensichtliche Raman-Charakteristikpeaks. Konzept bewiesen: ein Substrat für simultane Detektion verschiedener Proben.
Fazit
Zusammenfassend: einfaches, schnelles, günstiges Verfahren für ND-Fertigung als SERS-Substrate auf Großfläche mit musterbaren Strukturen vorgeschlagen und validiert. ND-Bildung basiert auf Elektrolyse von ITO-Film in Wassermedium. Faktoren: Elektrolysezeit, Spannung, ITO-Dicke bestimmen ND-Größe/Dichte. Gut verteilte NDs 50–60 nm via Elektrolyse 25 nm ITO, 150 V, 1,5 min (Tropfenelektrolyse). Fabriziertes ND-Substrat evaluiert via SERS nach ~77 nm Ag-Auftrag, diverse Sondenmoleküle. Reproduzierbare, sensitive Raman-Spektren für 4-MBT, R6G mit EFs ~1,12×106, ~6,79×105. Kombiniert mit Photolithografie: 3,5×3,5 cm2 Substrat musterbar zu 1, 9, 25 SERS-Bereichen → simultane Multi-Sample-Detektion auf einem Substrat mit je einem Tropfen Analytlösung. Hoch gefragt für schnelle Qualifizierung spezifischer Moleküle vor Ort: POCT, Umweltmonitoring, Flughafensicherheit. Technologie: einfache Fertigung unter milden Bedingungen, musterbar für Arrays auf Großfläche, integrierbar mit Mikrofluidik für High-Throughput Optofluidik.
Nanomaterialien
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