GoldMag: PSS-MA-Beschichtung verbessert Stabilität und optische Präzision für Protein-Detektion

Zusammenfassung

Gold-Magnetische Nanopartikel (GoldMag) haben große Aufmerksamkeit aufgrund ihrer einzigartigen physikalischen und chemischen Leistungen erregt, die jene von einzelnen Fe₃O₄- und Au-Nanopartikeln kombinieren. Die Beschichtung von GoldMag mit Polymeren erhöht nicht nur die Stabilität der Verbundpartikel in Puffer, sondern spielt auch eine Schlüsselrolle für die Etablierung von Point-of-Care-optischen Tests für klinisch relevante Biomoleküle. In dieser Arbeit wurde Poly(4-styrolsulfon-säure-co-maleinsäure) (PSS-MA), ein negativ geladenes Polyelektrolyt mit sowohl Sulfonat- als auch Carboxylat-Anionengruppen, verwendet, um die positiv geladene GoldMag (30 nm) Oberfläche zu beschichten. Der PSS-MA-beschichtete GoldMag-Komplex hat einen stabilen Plasmonenresonanz-Absorptionspeak bei 544 nm. Ein Paar Anti-D-Dimer-Antikörper wurde auf dieser GoldMag-Verbundnanopartikel-Oberfläche gekoppelt, und ein Zielprotein, D-Dimer, wurde im Bereich von 0,3–6 µg/ml detektiert. Die Verschiebung des charakteristischen Peaks, verursacht durch die Assembly von GoldMag durch die Bildung von D-Dimer-Antikörper-Sandwich-Brücken, ermöglichte die Detektion.

Hintergrund

Nutzend eine spezifische Magnetisierungseigenschaft, nämlich Superparamagnetismus, wurden magnetische Nanopartikel breit für biomedizinische Anwendungen untersucht, wie Arzneimittel/Gentherapie, Magnetresonanztomographie und biologische Assays. Gold-Magnetische Nanopartikel (GoldMag), bestehend aus Fe₃O₄/Au, besitzen nicht nur die physikochemischen Eigenschaften von Eisenoxid-Nanopartikeln, sondern auch Goldnanopartikel-Eigenschaften wie einfache Oberflächenfunktionalisierung und einzigartige optische Eigenschaften. Diese unterscheidenden Merkmale haben große Aufmerksamkeit im biologischen Bereich erregt, besonders in Biomolekül-Detektion basierend auf optischen Eigenschaften. Als Beispiel nutzten Wang et al. Fe₃O₄-Au-Stäbe als optische Sonden für Multiplex-Pathogen-Detektion. Allerdings treibt, wie bei anderen Nanopartikeln, die hohe Oberflächenenergie die GoldMag-Partikel zueinander, sodass sie in Pufferlösung Cluster bilden. Dies begrenzt ihre Anwendung für optische Detektion im biomedizinischen Bereich stark. Es ist daher entscheidend, die Aggregation von GoldMag zu verhindern und eine stabile Kolloid-Lösung zu gewährleisten. Die Anpassung von GoldMag für die Detektion von Zielmolekülen durch Beschichtung mit Polymeren hat hohen Nutzen. Es wurde berichtet, dass die Dispergierbarkeit von GoldMag durch Oberflächenmodifikation mit verschiedenen makromolekularen organischen Verbindungen verbessert werden kann, wie 11-Mercaptoundecansäure (MUA), Polystyrolsulfonat (PSS) und Polyethylenimin (PEI). MUA wurde mittels Ligand-Austausch-Strategie auf die GoldMag-Oberfläche gebracht. Es verbesserte die Stabilität von GoldMag-Kolloidlösungen durch Oberflächenmodifikation mit MUA. Diese MUA-GoldMag wurden in Protein-Detektion basierend auf optischen Eigenschaften verwendet. Allerdings war die MUA-Kette zu kurz, um ausreichend sterische Hindernisse für ausreichende Dispergierbarkeit der Partikel zu bieten. Zudem limitiert die geringe Dichte von Carboxylgruppen in MUA die Menge an Protein, die an GoldMag absorbiert werden kann. Diese Nachteile beschränken die Anwendung von MUA-Partikeln in optischen Instrumenten und limitieren die für Biomarker-Detektion erforderliche Sensitivität.

Poly(4-styrolsulfon-säure-co-maleinsäure) (PSS-MA) (PSS-MA 3:1, Mw ~ 20.000), ein Blockcopolymer, wird durch kovalente Bindung von PSS und Polymaleinsäure hergestellt und enthält sowohl Sulfonat- als auch Carboxylatgruppen. Die elektrostatische Abstoßung durch die große Anzahl an Carboxyl- und Sulfonatgruppen sowie die sterische Hinderung durch die lange Polymerkette von PSS-MA machen dieses Polymer sehr nützlich für die Stabilität der Nanopartikel. Tatsächlich wurde PSS-MA als Stabilisator in der Herstellung von Nanopartikeln verwendet, wie Eisenoxid-Nanomaterialien, Palladium und Ag-Au-Bimetall-Nanostrukturen. Johnston et al. berichteten, dass Copolymer-beschichtete Eisenoxid-Nanocluster einen höheren Grad an elektrosterischer Stabilisierung sicherstellen als Einzelmakromolekül-Polymer-beschichtete Eisenoxid-Nanocluster. Zusätzlich ermöglicht die große Anzahl an Carboxylgruppen im Polymaleinsäure-Moiety von PSS-MA chemische Modifikation mit Biomolekülen für biomedizinische Anwendungen.

D-Dimere sind stabile Endprodukte der Degradation von vernetztem Fibrin, resultierend aus verstärkter Fibrinbildung und Fibrinolyse. Die Bestimmung des D-Dimer-Spiegels im Blut wird breit in der Diagnose von Thromboembolien und Myokardinfarkt verwendet. Hier nutzten wir D-Dimer als Modell, um das Potenzial von PSS-MA-GoldMag für optische Detektion spezifischer Proteine zu evaluieren. Wir verwendeten ein Paar Anti-D-Dimer-Antikörper zur Immobilisierung auf PSS-MA-GoldMag, um Sonden für die Detektion von D-Dimer durch den Doppel-Antikörper-Sandwich-Immunoassay zu bilden.

Daher wurde in der vorliegenden Studie PSS-MA zur Oberflächenmodifikation von GoldMag verwendet. Dies verbesserte nicht nur die Stabilität der magnetischen Nanopartikel, sondern vermittelt auch die Konjugation zwischen Nanopartikeln und Antikörpern für Dimer-Detektion.

Methoden

Materialien und Reagenzien

GoldMag (5 mg/ml) wurden von Xi'an GoldMag Nanobiotech Co., Ltd. (Xi'an, VR China) bereitgestellt. Borsäure, Borax, Cetyltrimethylammoniumbromid (CTAB), Poly(4-styrolsulfon-säure-co-maleinsäure) (PSS-MA) (PSS-MA 3:1, Mw ~ 20.000) wurden von Sigma-Aldrich, USA gekauft. Ein Paar monoklonaler D-Dimer-Antikörper (Antikörper 1: M-2.1.16; Antikörper 2: M-1.2.57) wurden von Roche gekauft. D-Dimer wurde von Meridian Chemicals, USA gekauft.

Oberflächen-modifiziertes GoldMag mit PSS-MA

GoldMag wurden wie zuvor beschrieben synthetisiert. 13,3 ml CTAB (50 mmol/l) wurden zu 13,3 ml GoldMag (ca. 3 mg/ml) hinzugefügt. Das Gemisch wurde mechanisch gerührt (200 rpm) kombiniert mit Ultraschall (SB-5200DTD, China) für 30 min, gefolgt von weiterem Rühren ohne Ultraschall für weitere 30 min. Partikel wurden gründlich mit deionisiertem Wasser gewaschen. Die CTAB-GoldMag wurden in 10 ml deionisiertem Wasser redispergiert und 16 ml 25 % (w/w) PSS-MA-Lösung hinzugefügt, gefolgt von Rühren (180 rpm) für 90 min. Die modifizierten Partikel wurden zweimal mit deionisiertem Wasser gewaschen und in deionisiertem Wasser dispergiert.

Charakterisierung

Die PSS-MA-GoldMag wurden mit Transmissionselektronenmikroskop (TEM, Hitachi H-600, Hitachi Corporation, Japan) beobachtet. Die Größenverteilung wurde durch DLS (Zeta-Sizer, Malvern Instruments, UK) analysiert. Fourier-Transform-Infrarotspektroskopie (FTIR, Thermo Nicolet 5700, Thermo Nicolet Corporation, USA) wurde verwendet, um die Funktionsgruppen von PSS-MA-GoldMag zu charakterisieren. Ein Mettler Toledo SDTA 851e Thermogravimetrie-Analysator (TGA) wurde verwendet, um den Anteil der Polymer-Oberflächenschale unter den PSS-MA-GoldMag zu analysieren. Das Oberflächenplasmonenresonanz (SPR)-Spektrum von GoldMag wurde mit einem UV-2550 Spektrophotometer (Shimadzu, Japan) im Wellenlängenbereich 450–700 nm aufgezeichnet.

Herstellung der Anti-D-Dimer-Antikörper-PSS-MA-GoldMag-Sonde

Ein Milligramm GoldMag wurde in 1 ml Borax/Borat-Puffer (0,02 M, pH 7,4) suspendiert, enthaltend 75 mg/ml 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimid (EDC). Dann wurden 100 µg Anti-D-Dimer-Antikörper zur Suspension hinzugefügt, gefolgt von Ultraschall für 1 h. Drei Milliliter Blockierpuffer (0,02 M Borax/Borat-Puffer, pH 7,4, enthaltend 5 % BSA) wurden in das Gemisch gegeben und 1,5 h inkubiert. Nach Separation unter externem Magnetfeld wurde Anti-D-Dimer-Antikörper-PSS-MA-GoldMag-Verbund in Borax/Borat-Puffer bei 4 °C aufbewahrt. Die Konjugation von Anti-D-Dimer-Antikörper auf der PSS-MA-GoldMag-Oberfläche wurde durch SPR-Spektroskopie und Dynamische Lichtstreuung (DLS) Messung bestätigt.

Die D-Dimer-Lösung wurde durch Verdünnen einer D-Dimer-Stocklösung (40 mg/ml) mit Kälberserum hergestellt. Drei D-Dimer-Konzentrationen (0,6, 2 und 6 µg/ml) wurden verwendet, um die Reaktionszeit zwischen D-Dimer und Anti-D-Dimer-Antikörper-PSS-MA-GoldMag-Komplex zu optimieren. Zehn Mikroliter Anti-D-Dimer-Antikörper-PSS-MA-GoldMag (0,3 mg/ml) wurden mit 80 µl D-Dimer-Lösung (0,6, 2 und 6 µg/ml) gemischt, und das Gemisch wurde bei 25 °C für 10, 20, 30 und 40 min inkubiert. Die Wellenlänge des SPR-Peaks des PSS-MA-GoldMag-Verbunds wurde mit einem UV-2550 Spektrophotometer abgelesen.

D-Dimer-Lösungen mit Konzentrationen von 6, 3, 1,5, 0,75 und 0,3 µg/ml wurden präpariert, um die Relation zwischen D-Dimer-Konzentration und SPR-Spektrenänderung zu analysieren. Zehn Mikroliter Anti-D-Dimer-Antikörper-PSS-MA-GoldMag (0,3 mg/ml) wurden mit 80 µl D-Dimer-Lösung (6, 3, 1,5, 0,75 und 0,3 µg/ml) gemischt und das Gemisch bei 25 °C für 30 min inkubiert. Die Wellenlänge des SPR-Peaks von PSS-MA-GoldMag wurde mit einem UV-2550 Spektrophotometer abgelesen.

Um zu evaluieren, ob Triglyceride, Bilirubin und Hämoglobin unser Protein-Detektionssystem interferieren können, wurden D-Dimer-Lösungen (0 und 3 µg/ml) präpariert und 22 mg/ml Triglyceride, 0,2 mg/ml Bilirubin und 2 mg/ml Hämoglobin Proben separat hinzugefügt. Zehn Mikroliter Anti-D-Dimer-Antikörper-PSS-MA-GoldMag wurden zu den obigen Gemischen gegeben, und die Wellenlänge des SPR-Peaks des PSS-MA-GoldMag-Verbunds wurde mit einem UV-2550 Spektrophotometer abgelesen.

Ergebnisse und Diskussion

Schema 1 illustriert die entwickelten Verfahren für die Oberflächenmodifikation und Funktionalisierung von Partikeln für farbimetrische Detektion von Proteinen. Um die Adsorption und Inkorporation von PSS-MA auf den PSS-MA-GoldMag-Strukturen zu untersuchen, wurden FTIR-spektroskopische Analysen, SPR-Spektroskopie und TGA durchgeführt. Abbildung 1a zeigt das FTIR-Spektrum für reines PSS-MA, PSS-MA-GoldMag und GoldMag. Der breite, starke Band bei 3000–3700 cm⁻¹ entspricht der Streckung der –CO–OH-Gruppen und der Hydroxylgruppen von –SO₂–OH in Polymerketten. Symmetrische Vibrationen der Sulfonatgruppen (SO₃⁻) waren bei 1037 und 1126 cm⁻¹ und Streckungsvibrationen von C=C des Benzols bei 1403 und 1637 cm⁻¹. Diese charakteristischen Absorptionsbänder von PSS-MA wurden in PSS-MA-GoldMag beobachtet, was zeigt, dass die Rohpartikel erfolgreich mit PSS-MA beschichtet wurden. Die Änderung der Oberflächenchemiegruppen von GoldMag wurde durch einen klaren Blau-Shift von 11 nm von 555 auf 544 nm im SPR-Band nach Modifikation bestätigt (Abb. 1b). Die Position und Breite des SPR-Peaks war bezogen auf die Oberfläche, die Umgebung und die Dispergierbarkeit der Nanopartikel. TGA-Analyse zeigte, dass das Gewichtsverhältnis von organischem Material zu GoldMag fast 1:4 betrug (Abb. 1c). Bei niedriger Temperatur kann Gewichtsverlust auf Dehydratation zurückgeführt werden; bei Temperaturerhöhung kann Gewichtsverlust auf oxidative Zersetzung der organischen Moleküle auf der Oberfläche der modifizierten Partikel zurückgeführt werden. Während der Modifikation waren CTAB-GoldMag positiv geladen (+12,2 mV) und die Partikeloberfläche wurde negativ geladen (−24,5 mV) nach der PSS-MA-Beschichtung auf der Partikeloberfläche (Abb. 1d). Alle oben genannten Ergebnisse zeigen, dass PSS-MA erfolgreich auf der Oberfläche der Nanopartikel haftet.

Die Mikrographen (Abb. 2a, b) der GoldMag und PSS-MA-GoldMag, erhalten mit TEM, zeigen, dass diese Partikel nach Modifikation monodispers waren. Die Polymerschicht auf der Partikeloberfläche ist unter dem hochauflösenden Elektronenmikroskopiebild klar sichtbar, was weiter anzeigt, dass die Beschichtung von Polymer auf GoldMag erfolgreich war (Abb. 2b). Abbildung 2c zeigt, dass der durchschnittliche Durchmesser von PSS-MA-GoldMag 116 nm beträgt. Die PSS-MA-GoldMag-Suspension hat eine weinrote Farbe, was eine gute Stabilität der Nanopartikel anzeigt (1 Jahr in Wasser).

Die Stabilität der optischen Charakteristika von GoldMag und PSS-MA-GoldMag in Pufferlösungen mit unterschiedlichen pH-Werten wurde durch SPR-Spektroskopie analysiert. Wie in Abb. 3a gezeigt, wurde der SPR-charakteristische Peak bei GoldMag, suspendiert in Borax/Borat-Puffer mit pH 6,0 bis 9,0, zu längeren Wellenlängen von 555 nm verschoben. Die Zusammensetzung der Pufferlösung beeinflusst auch die Stabilität der GoldMag-Suspension. Die Position des SPR-charakteristischen Peaks wurde zu höheren Wellenlängen (558 nm) verschoben, wenn GoldMag in PB-Puffer (pH 7,4), Borax/Borat-Puffer (pH 7,4) und NaCl-Lösung (10 mM) suspendiert waren, im Vergleich zu denen in deionisiertem Wasser (550 nm) (Abb. 3c). Jedoch änderte sich der charakteristische SPR-Peak (545 ± 2 nm) nicht signifikant, wenn PSS-MA-GoldMag in Elektrolytlösung oder Pufferlösung mit unterschiedlichen pH-Werten dispergiert waren (Abb. 3b, d). Xia et al. und Storhoff et al. berichteten ebenfalls, dass Aggregation von Nanopartikeln das SPR-Spektrum zu längeren Wellenlängen verschieben kann. Das Zeta-Potenzial von GoldMag und PSS-MA-GoldMag wurde ebenfalls gemessen (Abb. 3e, f). Es wurde berichtet, dass ein niedriges Zeta-Potenzial (weniger als ±30 mV) zu Partikelagglomeration führen wird. Wenn GoldMag in PB-Puffer (pH 7,4), Borax/Borat-Puffer (pH 7,4) und NaCl-Lösung (10 mM) suspendiert waren, betrug das Zeta-Potenzial von GoldMag −16,7 ± 1,1 mV, −14,3 ± 2,1 mV und −8,9 ± 1,5 mV. Das Zeta-Potenzial von GoldMag betrug −14,2 ± 1,7 mV, −17 ± 1,1 mV, 13,9 ± 1,7 mV und −18,1 ± 1,6 mV, wenn Partikel in Borax/Borat-Puffer mit pH 6,0 bis 9,0 suspendiert waren. Jedoch verringert die Anhaftung von PSS-MA an GoldMag dessen Zeta-Potenzial in verschiedenen Elektrolytlösungen sowie bei unterschiedlichen pH-Werten drastisch. In allen Fällen war das Zeta-Potenzial niedriger als −30 mV. Diese Ergebnisse zeigen, dass die Oberflächenmodifikation von GoldMag mit PSS-MA seine Resistenz gegen Änderungen der Zusammensetzung und pH-Werte von Pufferlösungen signifikant verbessert und ein hohes Maß an Dispergierbarkeit sicherstellt.

Um die Interaktion zwischen Protein und PSS-MA-GoldMag zu untersuchen, wurden Anti-D-Dimer-Antikörper mit PSS-MA-GoldMag durch Reaktion zwischen Protein-Aminogruppen und Polymer-Carboxylgruppen vermittelt durch EDC konjugiert. Wie in Abb. 4a gezeigt, wurde ein Rot-Shift des SPR-Peaks nach der Reaktion von PSS-MA-GoldMag mit Anti-D-Dimer-Antikörpern beobachtet, was die Konjugation von Antikörpern auf Nanopartikeln anzeigt. Die Erhöhung des durchschnittlichen Partikeldurchmessers von 116 auf 130 nm bestätigt die Einführung des Anti-D-Dimer-Antikörpers auf PSS-MA-GoldMag (Abb. 4b). Der Einfluss der Antikörpermasse auf die optische Eigenschaft von PSS-MA-GoldMag wurde durch SPR-Spektroskopie nach Zugabe unterschiedlicher Mengen Anti-D-Dimer-Antikörper (20 bis 200 µg) zur PSS-MA-GoldMag-Suspension evaluiert. Wie in Abb. 4c gezeigt, änderte sich der SPR-Peak nicht und blieb bei 548 ± 3,0 nm, unabhängig von der Antikörpermenge.

Um die Aktivität der Antikörper nach Konjugation auf PSS-MA-GoldMag zu evaluieren, wurden Sonde A und Sonde B durch Immobilisierung eines Antikörperpaares (Antikörper 1 und Antikörper 2) und Antikörper 1 auf PSS-MA-GoldMag hergestellt. Die Interaktion zwischen den beiden Sondentypen und D-Dimer wurde durch SPR-Spektroskopie analysiert. Die beste Reaktionszeit wurde durch Beobachtung der Änderung des Maximums des SPR-Peaks für 40 min nach Zugabe von drei D-Dimer-Konzentrationen (0,6, 2 und 6 µg/ml) zu Sonde A erhalten. Wie in Abb. 5a gezeigt, wurde ein signifikanter Shift im Oberflächenplasmonenband beobachtet, resultierend aus der Aggregation von PSS-MA-GoldMag durch Querverbindungen zwischen Antigen-Antikörper-Sandwich-Brücken über die Zeit. Bei niedriger Konzentration (0,6 µg/ml) gab es keine signifikante Änderung im SPR-Spektrum von 20 bis 40 min, was anzeigt, dass 20 min für die Reaktion von 0,6 µg/ml oder niedrigeren D-Dimer-Konzentrationen ausreichen. Jedoch bei mittleren und hohen D-Dimer-Konzentrationen (2 und 6 µg/ml) nahm die Wellenlänge bis 30 min weiter zu. Dies zeigt, dass die beste Reaktionszeit 30 min ist. Wie in Abb. 5b gezeigt, offenbarte das SPR-Spektrum der Verbundpartikel einen distinkten Rot-Shift in der Oberflächenplasmonenresonanz von λ_max = 550 auf 570 nm und Intensitätsabnahme des charakteristischen Peaks, als die D-Dimer-Konzentration von 0,3 auf 6 µg/ml stieg. Dies wird durch die Aggregation von PSS-MA-GoldMag verursacht, hervorgerufen durch die Querverbindung von D-Dimer mit Antikörper 1 und Antikörper 2 auf Sonde A. Die Aggregation von PSS-MA-GoldMag resultierte in der Änderung der optischen Eigenschaften des Goldteils von PSS-MA-GoldMag. Jiang et al. und Li et al. berichteten ebenfalls, dass Aggregation von Nanogold das SPR-Spektrum von Nanopartikeln rot verschiebt und verbreitert. Jedoch wurde in Abb. 5d kein Rot-Shift beobachtet, weil die Interaktion zwischen D-Dimer und Antikörper 1 nicht zur Assembly von Nanopartikeln führen konnte. Darüber hinaus wurde ein unterscheidbarer Rot-Shift (5 nm) beobachtet, selbst wenn die Menge an D-Dimer, die zu Sonde A hinzugefügt wurde, so niedrig wie 0,3 µg/ml war, was anzeigt, dass die Nachweisgrenze unter den diagnostischen Cut-off-Werten (0,5 µg/ml) für diesen Biomarker liegt. Ein linearer Zusammenhang zwischen der SPR-Spektralpeak-Position und der D-Dimer-Konzentration wurde im Bereich von 0,3–6 µg/ml gefunden (r² = 0,9944) (Abb. 5c).

Wie in Abb. 6 gezeigt, wurde kein signifikanter Shift des SPR-charakteristischen Peaks von PSS-MA-GoldMag in Gegenwart von Triglyceriden, Bilirubin und Hämoglobin gefunden. Dieses Ergebnis zeigt, dass unser Protein-Detektionssystem keine interferierenden Reaktionen mit Triglyceriden, Bilirubin und Hämoglobin hat.

Diese Ergebnisse zeigen, dass PSS-MA-GoldMag ein vielversprechendes magnetisches Nanopartikel für Protein-Immobilisierung ist und eine Sandwich-Brücke auf der Partikeloberfläche via Antikörper 1-Zielprotein-Antikörper 2 bilden kann. Dies macht PSS-MA-GoldMag wertvoll als Material für Point-of-Care-optische Detektion von Biomarkern.

In dieser Studie wurde PSS-MA erstmals für die Modifikation von GoldMag verwendet (Schema 1). Die Einführung von PSS-MA auf die Oberfläche von GoldMag verbesserte dessen Stabilität in Pufferlösung signifikant. Zusätzlich zur sterischen Hinderung durch die lange Polymerkette von PSS-MA verursachen die Carboxylgruppen und die Sulfogruppe in PSS-MA elektrostatische Abstoßung zwischen den Nanopartikeln. Dies verbessert die Stabilität von PSS-MA-GoldMag signifikant. Die hohe Anzahl an Carboxylgruppen auf der Partikeloberfläche erfüllt die Anforderung für Konjugation mit Biomolekülen.

Fazit

In der vorliegenden Studie wurde eine einfache und schnelle Methode für die Beschichtung von GoldMag mit PSS-MA berichtet. Die Ergebnisse zeigen, dass die kolloidale Stabilität und Dispergierbarkeit von GoldMag durch Einführung von PSS-MA signifikant verbessert wurden. Die Partikel zeigen gute Stabilität in Pufferlösung mit breitem pH-Bereich. Zudem bietet die Anwesenheit von Carboxylgruppen die Option, Proteine an die Nanopartikel zu konjugieren. Mit D-Dimer und seinem Antikörper als Modell wurde gefunden, dass die optische Charakteristik durch die Quervernetzung zwischen Antigen und Antikörper-Nanopartikel-Verbund angepasst werden kann. Die Ergebnisse zeigen, dass das PSS-MA-modifizierte GoldMag als sehr vielversprechender Kandidat für optische Detektion basierend auf Immunoassays dienen kann.

Abkürzungen

DLS:

Dynamische Lichtstreuung

FTIR:

Fourier-Transform-Infrarotspektroskopie

GoldMag:

Gold-magnetische Nanopartikel

MUA:

11-Mercaptoundecansäure

PEI:

Polyethylenimin

PSS:

Polystyrolsulfonat

PSS-MA:

Poly(4-styrolsulfon-säure-co-maleinsäure)

SPR:

Oberflächenplasmonenresonanz

TEM:

Transmissionselektronenmikroskop

TGA:

Thermogravimetrie-Analysator